Трафарет тела человека: шаблон человека Раскраски распечатать бесплатно.

Содержание

Трафареты для бодиарта и аквагрима. Большой выбор!

Для чего? Кольцо для трафаретов отличное решение для хранения ваших трафаретов для бодиарта. Это кольцо поможет не потерять трафареты, а также сгруппировать их по стилям и размерам. Для работы вы можете не снимать трафарет с кольца. Внутренний диаметр кольца — 25мм. Цена за штуку. ..

30 R

Для чего?   Набор трафаретов «KIDS» идеально подходит для фантазийного и тематического боди- и фэйс-арта. Большой выбор рисунков с любимыми героями мультиков подойдет для детей всех возрастов. Создайте нужный образ за несколько минут!   Что внутри?   В набор.

.

Трафареты для аквагрима

1,340 R 1,140 R

Для чего?   Набор трафаретов «PROFI» идеально подходит для фантазийного и тематического боди- и фэйс-арта. Большой выбор рисунков подойдет для создания множества вариантов рисунков и дополнения композиций недостающими деталями. Создайте нужный образ за несколько минут!   ..

Трафареты для аквагрима

1,470 R 1,270 R

Для чего?   Набор трафаретов «Аквагрим» идеально подходит для фантазийного и тематического боди- и фэйс-арта. Большой выбор рисунков подойдет для детей всех возрастов. Создайте нужный образ за несколько минут!   Что внутри?   В наборе 6 трафаретов, размер од..

Трафареты для аквагрима

769 R 569 R

Для чего?   Набор трафаретов «Аквагрим» для девочек, идеально подходит для фантазийного и тематического боди- и фэйс-арта. Большой выбор рисунков подойдет для девочек всех возрастов. Создайте нужный образ за несколько минут!   Что внутри?   В наборе 13 трафа..

1,500 R 1,300 R

Для чего?   Набор трафаретов «Аквагрим» для мальчиков, идеально подходит для фантазийного и тематического боди- и фэйс-арта. Большой выбор рисунков подойдет для мальчиков всех возрастов. Создайте нужный образ за несколько минут!   Что внутри?   В наборе 13 т..

1,500 R 1,300 R

Для чего?   Оригинальный контурный трафарет для бодиарта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены различные акценты и мелкие детали, которыми вы можете дополнить уже готовый ..

140 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта.

Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены геометрические узоры, в работе вы можете использовать как весь трафа..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображен градиент состоящий из кругов разного диаметра, в работе вы можете исп..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены падающие звезды в работе вы можете использовать как весь трафарет та..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены маленькие звёзды, в работе вы можете использовать как весь трафарет ..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены звезды разного размера, в работе вы можете использовать как весь тра..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены зимние узоры, в работе вы можете использовать как весь трафарет так ..

120 R

Для чего?   Оригинальный овальный трафарет для детского боди- и фэйс-арта.

Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. На трафарете изображены треугольники разного размера, в работе вы можете использовать как ве..

120 R

Для чего?   Оригинальный контурный трафарет для бодиарта. Может применяться на любых участках тела, легко моется и дезинфицируется, многоразового применения. Этот трафарет удобен для быстрого нанесения «художественных» капель, а также кровоподтеков..

140 R

Человек начал украшать свое тело с древних времен. Наши предки украшали свои тела, чтобы напугать врагов и в целях защиты от злых духов. Рисунки на теле показывали статус человека. И в наши дни, аборигены Австралии, Азии и Африки украшают свои тела натуральными красителями: соком фруктов, глиной и травами

В наше время бодиарт позволяет самовыразиться, показать свою индивидуальность и подходит тем, кто хочет быть не таким как все. 

 

Бодиарт обрел свою популярность в Америке, в начале 20 века. Затем стремительно распространился по миру. Современный бодиарт это сплав дизайна, рисования и макияжа. В настоящее время, бодиарт используется в развлекательных, а также в качестве рекламы. В развлекательных целях бодиарт создается для красоты, во время праздника или для вечеринки. Футбольные фанаты, страйкболисты, охотники и спортсмены постоянно используют бодиарт в своих хобби. Пользуются популярностью показы бодиарта, где рисунки нанесены на обнаженных людей.

Трафареты для бодиарта и аквагрима — оптимальный вариант для тех, кто не умеет рисовать и просто для тех, кто хочет сэкономить время. Сложные текстуры, ориентальные узоры, небольшие акценты и детали образа — вот неполный список задач, которые вы сможете выполнить с помощью трафаретов для бодиарта. Каждый трафарет выполнен из высокачественного гибкого ПЭТ листа. Трафареты с обеих сторон покрыты защитной пленкой, они легко моются и дезинфицируются. Вы можете купить трафареты для детей, тематические трафареты, акцидентные и многие другие.

Мы продаем трафареты для бодиарта и аквагрима как в розницу, так и оптом от двух штук. Специально для детского аквагрима, в продаже есть набор трафаретов для мальчиков и набор трафаретов для девочек. Обратите внимание, в описании к каждому трафарету указан его точный размер!

Как правильно нарисовать человека: советы начинающему художнику

Рисование портрета — сложная задача. Однако всем нужно с чего-то начинать. Если вы хотите нарисовать человека, но не знаете, как это сделать, проще всего воспользоваться готовым мастер классом. Такое занятие поможет понять, с чего начать работу и на какие детали стоит обратить особое внимание в процессе рисования.

Изображение человека: пошаговая инструкция

В идеале портрет должен передавать не только особенности внешнего вида человека, но и его позу, эмоциональное состояние и настроение. Неслучайно такой вид рисунка считается в изобразительном искусстве наиболее сложным. Начинающему художнику стоит запомнить: главное на первых этапах — следить за пропорциями. Если особенности анатомии будут соблюдены, фигура станет выглядеть реалистично, а ведь это уже важно.

Пошаговая инструкция по изображению тела и скелета

Такой вариант портрета считается классическим: именно с него начинается обучение в художественных школах. Если вам нужно изобразить стоящего человека, выполняйте действия в следующем порядке.

  1. Проведите на листе вертикальную линию и разделите ее на 7-8 частей (это необходимо для соблюдения пропорций).
  2. Изобразите на получившейся шкале части тела человека следующим образом: голова — одно деление, грудная клетка — два деления, таз — четвертое деление, колени — пятое деление и стопы в самом низу.
  3. Обведите получившуюся фигуру одной линией (при необходимости добавьте набросок прически и одежды).
  4. Добавьте на рисунок детали. Фигура человека готова.

Изображая части тела на шкале, не забывайте про шею и руки. Они тоже должны быть на рисунке и выглядеть пропорционально. Также не стоит изображать части тела сразу реалистично. Для начала обозначьте, например, плечи и предплечья с помощью вытянутых овалов, обозначьте суставы во все необходимых местах. Так удастся сделать фигуру более реалистичной и анатомически правильной.

Как нарисовать лицо

Именно эта часть человеческого тела привлекает особое внимание. Так что при создании портрета нужно постараться и изобразить лицо очень правдоподобно. Для этого придется обратить внимание на три зоны: глаз, носа и губ.

Чтобы модель не выглядела слишком стандартно, постарайтесь максимально реалистично передать форму глаз. То же самое касается и носа: он сильно выдаётся на лице и потому всегда привлекает к себе внимание. Однако особенно важно правильно изобразить губы. Если эта часть лица окажется искажена, у модели на портрете появится нехарактерное выражение лица. Также неверно изображенные губы могут полностью исказить симметрию рисунка и сделать его просто нереалистичным.

Секреты: как красиво нарисовать человека

Огромную роль для художника играют материалы, с которыми он работает. Так, для создания набросков портрета обычно используется карандаш с маркировкой жёсткости 2B. Он имеет мягкий грифель и потому позволяет создавать плавные линии и легко стирается при необходимости. Также новичкам в мире рисования стоит запомнить следующие советы.

  1. Самое главное — это глаза. Изображая человека, именно глазам надо уделить особое внимание. Психологи доказали: правильные пропорции лица нравятся всем людям без исключения. Так что постарайтесь, чтобы на вашем рисунке глаза выглядели одинаковыми и симметричными.
  2. Рисуйте по трафарету. Если предварительно расчерчивать лист каждый раз вам не хочется, сделайте трафарет. Его получится создать в любом графической дизайнере онлайн или нарисовать от руки. Далее останется только подложить набросок под лист и нарисовать фигуру в соответствии с законами пропорций.
  3. Экспериментируйте с позами модели. Если вы только начинаете рисовать, но хотите создать эффектный портрет, попробуйте изобразить человека в каком-то необычном виде. Например, нестандартная поза всегда привлекает внимание зрителей.

Чтобы совершенствоваться в умении рисовать, приобретите тематическую литературу. В хороших справочниках предлагаются разнообразные идеи, которые помогут сделать портреты ещё более красивыми и реалистичными. И, конечно, не стоит забывать о практике: именно с ее помощью удастся отточить навыки до совершенства.

 

Нозологический электродный трафарет №1 (маска для электросна)

Нозологический электродный трафарет №1 (маска для электросна)

   Нозологический электродный трафарет №1 (маска для электросна) предназначен для глазнично-сосцевидной фиксации электродов на поверхности головы пациента для проведения процедур транскраниальной электротерапии.

 Части трафарета выполнены из силиконовой резины по ГОСТ Р 57399 и имеют вид охватывающих голову ремней на которых, в соответствующих местах, закреплены четыре электрода выполненных в виде чашек из диэлектрического материала с токопроводящей пластиной прикрепленной к внутренней стороне их днища. Также на трафарете смонтирована электрическая проводка и разъем для подключения электродного трафарета к прибору для электротерапии.

Электродный трафарет №1 подключается к прибору кабелем пациента №9.

При проведении процедуры чашки трафарета заполняют ватными тампонами, пропитанными водой и надевают электродный трафарет на голову пациента. При этом два электрода накладывают на сомкнутые веки глаз, а два других – на область сосцевидных отростков височных костей.

Основные технические характеристики нозологического электродного трафарета №1 приведены в таблице А.

Используется в следующих приборах:

  • «Радиус-01»
  • «Радиус-01 ФТ»
  • «Радиус-01 Интер СМ»
  • «Радиус-01 Кранио»

 

Таблица А –Основные технические характеристики нозологического электродного трафарета №1:

Тип Масса, г. , не более
50 120

 

Дополнительные технические характеристики нозологического электродного трафарета №1:

  • Нозологический электродный трафарет №1 изготовлен из материалов, разрешенных Министерством здравоохранения Республики Беларусь, а их поверхности устойчивы к дезинфекции.
  • Нозологический электродный трафарет №1 является изделием многократного применения, кратковременного контакта, контактирующим с кожей тела человека.
  • Нозологический электродный трафарет №1 стерилизации не подлежит, для повторного использования требуется проведение их дезинфекции соответствующими методами и средствами.
  • Утилизация использованного нозологического электродного трафарета №1 не требует специального оборудования и осуществляется стандартным способом.
  • Нозологический электродный трафарет №1 выпускается на производстве, сертифицированном по стандарту ISO9001-2015.

 

программа для трафаретов — 25 рекомендаций на Babyblog.ru

о том, что детей нужно хвалить, если есть хоть малейшая на то причина. А причину, если внимательно приглядеться к чаду, всегда можно найти.

Меня вот не хвалили в детстве. Всё больше требовали. А я исполняла требования. Тогда была молодцом. Такая была схема.

Когда я сама стала мамой, на примере общения со своим ребёнком, я поняла, что не умею хвалить. Невозможно дать то, чего у тебя нет. Это легко объяснить на примере с конфетой: если у тебя нет конфеты, то ты не сможешь её дать ребёнку.

Зато меня научили требовать. Это я умею. Поэтому, зная определённые недостатки Златы, я требовала и требовала их исправить. В своё оправдание скажу, что я и сама прилагала к исправлению недостатков, максимум своих моральных и материальных усилий. Периодически привлекая к этому делу специалистов. Многие из которых говорили прямо, что лечить нужно маму, а не ребёнка. То бишь меня.

Однажды, проделав огромную работу внутри себя, я решила смириться с тем, что есть вещи, которые я не в силах исправить. При этом не опуская руки продолжать диагностировать и исправлять всеми способами ситуацию.

В связи с этим я решила не переживать, что моя дочь не сможет достойно тянуть программу средней школы и приготовилась с этим жить, продумывая что я могу ещё дать кроме хорошего образования.

Мысль о будущей школе лишила меня надолго сна и натолкнула на решение проблемы. Задолго до 2015 года я узнала, что самые ранние курсы подготовки к школе принимают детей с 5-ти лет.

Мне казалось, что моему ребёнку 2 года — это минимум, который нужен для подготовки к школе, так как все вокруг дети казались мне умнее и сообразительнее, чем Злата. Ещё и здесь почитаешь мам первоклашек — волосы дыбом становятся от ужаса.

Я записала Злату как только ей исполнилось 5 лет, и в конце августа мне позвонили, объявив дату собрания для родителей подготовишек. Мы были на морях, на собрание попасть не смогли.

Сегодня было первое диагностическое занятие. Родителям объяснили, что на первом занятии преподаватель продиагностирует 5-ти леток, чтобы определить в группы с подходящими для них программами. Детей, которые не потянут программу, определят в группу к 4-х леткам. Я вжала голову в плечи. Детей сильных отсортируют к 6-ти леткам, чтобы не растягивать их подготовку на 2 года.

Дверь за детьми закрылась, и занятие началось.

Если бы я грызла ногти, я бы их сгрызла на год вперёд, так я волновалась за свою дочь, обратившись в слух, пытаясь расслышать звуки из-за закрытой двери.

45 минут прошли, дверь открылась и родителей пригласил преподаватель в аудиторию. Первой досталось бабушке какого-то Саши, который программу как выяснилось потянет, но его самого очень много. Потом расстроили маму Эли, у которой уточнили точно ли её дочери уже 5 лет, так как программу она не потянет, есть необходимость заниматься с 4-х летками. Когда всех деток назвали, а Злату нет, я уже боялась поднять глаза — думала всё абзац — не примут мою дочь.

Тут преподаватель спрашивает, указывая рукой на Злату, а это чей ребёнок? Я говорю — мой… Она меня пыльным мешком по башке: «Вот, идеальный ребёнок! Подготовка на 5 с плюсом. С ней кто-то уже занимался?»

Я говорю: «Я занималась сама.»

Преподаватель: «Я оставлю её у себя в группе, чтобы был лидер в классе. Ребёнок отлично ориентируется в заданиях, видно сразу, что ей знакома система занятий, считает, складывает, фигуры характеризует, отличия друг от друга, пересказывает отлично и даже сложные задания сделала быстрее заданного времени.»

Все родители смотрят на меня. А я это… того.. стою и плачу.

Никогда не забуду этого дня. И да, нужно выпить что-нибудь седатативного. А то я готовилась немного к другому исходу событий, а тут неожиданно…

Когда-нибудь Злата вырастет и прочтёт этот пост. Посвящённый моему сожалению, что я её недооценивала. Вернее, не её саму, а её способности. Она и сама скорее всего будет помнить этот день, когда после первого в её жизни урока, преподаватель поставила её в пример перед остальными учениками.

К понедельнику нужно купить все пособия, линейки, трафареты и тетради. Я работаю в пятницу, субботу и воскресенье. Придётся папе доверить это архиважное дело)))

Успехов тебе, моя радость! И с первым в твоей жизни Днём знаний


Трафарет для рисунков на теле 5х5 см 616, цена 6 грн.

Изготовим трафареты высокого качества по минимальным ценам оптом от 1000 шт.  Клей для тела в стеклянных и пластиковых бутылочках и на разлив. Глиттеры, перламутры для тела любая фасовка: пакеты, баночки. Цены оптовые можно уточнить у менеджера в телефонном режиме. 

Благодаря такому трафарету для тату можно легко и быстро создать на теле рисунки с помощью глиттера (блесток), красок или хны. Изделие выполнено из специальной пленки на клеевой основе, которая хорошо фиксируется на коже и легко снимается. С помощью трафарета вы легко сделаете на теле красивый рисунок.

Способ применения:

Перед нанесением рисунка кожу необходимо подготовить: удалить лишние волоски и, если необходимо, обработать скрабом, чтобы удалить отмершие частички кожи. Обезжирить хлоргексидином (аптечный товар) или спиртовым раствором (водка, антисептик)

Снять нижнюю часть трафарета для тела и наклеить его тщательно на кожу.

Снять верхнюю прозрачную пленку.

Хна : Нанести на часть, предназначенную для рисунка, хну. Дождаться полного высыхания и аккуратно снять трафарет. Остатки хны удалить соскоблить не смывая. После того, как рисунок хорошо просох, рекомендуем смазать его маслом для закрепления хны, несколько часов не мочите водой. Масло закрепляет хну и рисунок становится ярче и дольше держится на коже.

Блестки: Нанести на часть, предназначенную для рисунка, клей для тела. Сверху присыпать блестками одного или нескольких цветов. Аккуратно прижать салфеткой. Подождать 2-3 мин до полного высыхания клея. Снять трафарет.

Стразы: Нанести на часть, предназначенную для рисунка, клей для тела. С помощью магнитного карандаша для страз или пинцета установить камни. Подождать 2-3 мин до полного высыхания клея. Снять трафарет.

При аккуратном обращении трафарет можно использовать несколько раз для одного человека. 

Вместе с трафаретами заказывают: другие трафареты     клей для тела     глиттер    хна,  стразы

 

Перспективное планирование дидактических игр по развитию зрительного восприятия у детей с нарушением зрения в старшей группе

Перспективное планирование дидактических игр по развитию

зрительного восприятия у детей с нарушением зрения в старшей группе.

Лексическая тема: «Моё тело».

Пн. Д/и «Рассмотри себя в зеркало».

Цель: учить детей зрительно обследовать своё тело (проводить взгляд по всему телу, выделять основные части: голова, туловище, 2 руки (правая и левая), 2 ноги (правая и левая), определять форму каждой части тела (голова круглая, туловище прямоугольное и т.д.), их пространственное положение (голова сверху, ноги снизу, туловище посередине, справа одна рука, слева другая рука и т.д.), подключать для обследования осязательный анализатор.

Оборудование: большое зеркало.

Д/и «Поиграем с куклой».

Цель: закрепить умение зрительно рассматривать тело человека с помощью заместителя, выделять его основные части тела, форму, величину, пространственное положение, научить детей правильно действовать с эти предметом.

Вт. Д/и «Узнай, кто нарисован».

Цель: учить детей осуществлять проекцию объёмного предмета на плоскость, узнавать тело человека по контурному и силуэтному изображению, закрепить умение называть и показывать основные части тела, их пространственное положение.

Оборудование: большой лист ватмана, чёрный маркер.

Ребёнка кладут на ватман, обрисовывают его тело маркером, затем ребёнок встаёт. Далее, педагог вместе с детьми рассматривают контурное изображение тела. После этого можно предложить рассмотреть силуэтное изображение различных людей на карточках.

Д/и «Нарисуй по трафарету».

Цель: закреплять умение обводить по трафарету изображение человека, прослеживать линию, выделять основные части тела, их форму, величину, пространственное положение, совершенствовать двигательную память.

Оборудование: трафареты с изображением человека, листы бумаги, фломастеры.

Ср. Д/и «Составь целое из частей».

Цель: учить детей составлять целое изображение из его частей, закрепить пространственное положение, развивать целостное восприятие.

Оборудование: лист ватмана с уже нарисованным контурным изображением тела ребёнка разрезанный на части (по частям тела).

Чт. Д/и «Палка, палка, огуречик….».

Цель: учить составлять схематичное изображение человека из счётных палочек, закрепить названия частей тела, их пространственное положение.

Оборудование: набор счётных палочек, образец.

Пт. Д/и «Найди на картинке».

Цель: закрепить умение выделять изображение человека из многообразия других предметов, фиксировать взгляд на изображении, узнавать и называть его словом.

Оборудование: сюжетная картинка.

Лексическая тема «Игрушки».

Пн.Д/и «Чудесный мешочек».

Цель: закрепить знания о разных видах игрушек, их форме, величине; развивать умение их зрительно обследовать, выделять основные части, дополнять зрительную информацию представлениями, полученными различными анализаторами.

Оборудование: мешочек из ткани, игрушки (собака, кукла, пирамидка, машинка, юла и др.).

Д/и «Мой весёлый звонкий мяч».

Цель: учить называть словом и понимать скоростные качества (быстро, медленно) мяча, закрепить название формы.

Вт. Д/и «Нарисуй по трафарету».

Цель: закреплять умение обводить по трафарету изображение, зрительно прослеживая контур предмета; совершенствовать умение узнавать предмет по его силуэту.

Оборудование: трафареты с изображением игрушек, листы бумаги, фломастеры.

Д/и «Подбери силуэт к предмету».

Цель: учить соотносить натуральный объект и его силуэтное изображение; активизировать фиксацию, локализацию, развивать зрительную память.

Оборудование: различные игрушки и на карточках их силуэтное изображение.

Ср. Д/и «Составь из мозаики предмет».

Цель: закрепить умение составлять изображения игрушек, совершенствовать умение работать по образцу: зрительно выделять части предмета, их местоположение, величину, цвет и т.д., соотносить изображение на образце со своим.

Оборудование: кнопочная мозаика, образцы изображений игрушек (мяч, флажок, домик, кораблик и др.).

Чт. Д/и «Составь пирамидку».

Цель: закрепить у детей название геометрической фигуры (круг), учить составлять из частей целый предмет в убывающем порядке по величине.

Оборудование: пирамидка из семи колец. Д/и «Положи мяч в свою корзину», «Подбери ленту для куклы».

Цель: учить детей составлять изображение игрушек из геометрических фигур по трафаретной линейке, соотносить объекты по величине.

Пт. Д/и «Рассмотри картинку и назови, какие игрушки ты видишь?».

Цель: закрепить умение детей зрительно выделять, фиксировать и локализовать изображения игрушек среди других изображений предметов, соотносить изображение со словом.

Оборудование: сюжетная картинка «В детском саду».

Д/у «Назови, какие игрушки стоят на верхней, нижней полке?».

Цель: та же.

Теневой театр «День рождения у куклы Маши».

Цель: закрепить умение детей узнавать изображения игрушек по их силуэтному изображению.

Оборудование: силуэтные изображения игрушек, экран, настольная лампа.

Лексическая тема «Одежда».

Пн. Д/и «Оденем куклу»

Цель: учить детей узнавать и называть предметы одежды, практически действовать с ними, получая дополнительную информацию через осязательный анализатор, выделять части одежды (рукав, карман, пуговица, воротник и др.), определять цвет, форму, величину, пространственное положение частей (правый рукав, левый рукав, верхняя пуговица и т.д.).

Оборудование: предметы натуральной одежды и кукольной (майка, трусы, платье, носочки, пальто, шапка, шарф и др.), кукла.

Вт. Д/и «Лото» или «Найди такой же по силуэтному, контурному изображению».

Цель: закрепить умение зрительно находить одинаковые предметы одежды по цветному изображению, соотносить цветное изображение с контурным или силуэтным, развивать целостное восприятие.

Оборудование: парные карточки с цветным, контурным, силуэтным изображением предметов одежды.

Д/у «Обведи предмет через кальку».

Цель: учить детей прорисовывать изображения предметов одежды через кальку, закрашивать полученное контурное изображение, узнавать в нём предмет и соотносить его с названием, стимулировать зрительные функции, развивать цветовосприятие.

Оборудование: книжки-раскраски, калька, фломастеры.

Д/и «Подбери нитки к платью».

Цель: закрепить умение соотносить цветной силуэт платья с цветом ниток, развивать умение узнавать и называть цвета спектра (красный, жёлтый, зелёный, синий, чёрный, белый).

Ср. Д/И «Составь из частей».

Цель: закрепить умение составлять целый предмет из частей, закрепит название частей (рукав, воротник, карман и т.д.), их форму, пространственное положение.

Оборудование: разрезные картинки с изображением предметов одежды.

Д/и «Что куда надеть?».

Цель: учить дифференцировать предметы одежды по признаку «куда её надевают» (на голову, на туловище, на ноги, на руки и т.д.), закрепить название частей тела и одежды.

Оборудование: плоскостная кукла, плоскостные цветные изображения предметов одежды.

Чт. Д/у «Нарисуй шапочку по транспортиру».

Цель: учить детей определять форму шапочки, соотносить её части с геометрическими фигурами (полукруг и прямоугольник), соединять эти фигуры в единое целое, используя транспортир (вместо трафарета), развивать бифовеальное слияние, целостное восприятие предмета.

Оборудование: альбомный лист, транспортир, фломастер.

Пт. «Найди свою одежду среди другой».

Цель: учить детей узнавать и называть свою одежду по цвету, величине, размеру, фасону, закрепить умение зрительно рассматривать предметы, фиксировать на них взгляд.

Оборудование: предметы одежды.

Теневой театр «Мойдодыр».

Цель: закрепить умение детей узнавать предметы одежды по их силуэтному изображению.

Оборудование: силуэтные изображения предметов одежды, экран, настольная лампа.

Лексическая тема «Домашние животные».

Пн, Д/у «Рассматривание объёмных картин».

Цель: учить детей различать и называть домашних животных по внешним признакам, по месту обитания (живут в доме или возле дома), закрепить умение обследовать предмет с опорой на зрительный и тактильный анализатор, выделять части, их форму, цвет, величину.

Оборудование: объёмные картины с изображением кошки, собаки, свиньи, лошади.

Д/у «У нас в гостях кошка»

Цель: закрепить умение обследовать натуральное животное с помощью зрительного и тактильного анализатора, учить называть ощущения, полученные от обследования словом, выделять свойства и качества, характерные для данного животного, его основные части, форму, цвет

Оборудование: натуральный объект – кошка.

Вт. Д/у «Рисуем по трафарету»

Цель: закрепить умение проводить линии точно по трафарету, прослеживая движение линии по контуру предмета, выделять части животных: туловище, голова, лапы, хвост, уши, глаза, носик, усы и т.д.; развивать умение зрительно воспринимать силуэтное и контурное изображение животных.

Оборудование: трафареты с изображением животных, фломастеры, листок бумаги.

Д/и «Наложи цветное – на контурное изображение».

Цель: закрепить умение узнавать животных по их цветному плоскостному изображению, соотносить его с контурным изображением, учить приёму наложения, развивать бифовеальное слияние двух изображений в одно целое.

Оборудование: карточки с цветным и контурным изображением домашних животных (лошадь, корова, кошка, собака, свинья и др.).

Ср. Д/и «Разрезные картинки».

Цель: совершенствовать навык составления целого изображения из частей, закрепить названия частей, их форму, величину, пространственное положение.

Оборудование: карточки с изображением домашних животных, разрезанные на 3–4 части.

Чт. Д/и «Нарисуй кошку по транспортиру».

Цель: закрепить умение составлять изображение кошки по транспортиру, закрепить названия геометрических фигур и их соответствие части тела.

Оборудование: транспортир, альбомный лист, фломастер.

Д/и «Геометрическая мозаика».

Цель: учить по образцу составлять изображение собаки из геометрических фигур, закрепить их название, развивать соотносительную функцию.

Пт. Д/и «Найди и назови на картинке».

Цель: совершенствовать умение зрительно отыскивать нужный предмет, фиксировать на нем взгляд, узнавать его по цветному плоскостному изображению, определять пространственное положение на картине.

Оборудование: сюжетная картинка «На скотном дворе».

Теневой театр «Кто сказал мяу?».

Цель: закрепить умение узнавать домашних животных по их силуэтному изображению.

Оборудование: силуэтные изображения домашних животных, экран, настольная лампа.

Блеск и нищета институциональных трафаретов

Аналогично центр тяжести диссертационного производства не сместился кардинально в направлении ведущих научных центров. Так, например, в 2011–2012 годах доля докторских защит, состоявшихся в институтах РАН, была 11,4%. На университеты, ставшие частью проекта 5-100, приходилось 14% защит, на все остальные учреждения — 74,6%. В 2014–2015 соотношение изменилось и составило 12,5%, 15,1% и 72,5% соответственно — увеличение произошло, но оно кажется мизерным, особенно с учетом того, что доля преподавателей, работающих в ведущих университетах, тем временем также стремительно росла, в том числе за счет слияний и поглощений.

Распределение защит между столичными городами и регионами также изменялось в пределах долей процента. Львиная доля защит — порядка 33% — приходится на Москву, и эта доля остается величиной замечательно постоянной. При этом ВАК с куда большей охотой закрывала диссертационные советы в невыдающихся институциях, однако, судя по всему, те, кто иначе защищался бы в них, мигрировали в другие такие же институции, а не в вузы, которым ВАК хотела бы доверить контроль над интеллектуальной жизнью. В целом кажется, что те, кому повезло вписаться в трафарет, защищались, а остальные — нет, но нет свидетельств, что вписавшиеся лучше соответствовали озвученным представлениями самой комиссии о «настоящей науке».

Почему трафарет, сократив число остепененных, так мало изменил их профиль? Помимо общей инертности академического сословия, основным фактором здесь кажется то, что трафарет создавал множество узких мест, которые его создатели не предвидели и которые в некоторых случаях затрагивали как раз тех, кого они хотели бы видеть в рядах обладателей степени. Так, со сложностями сталкивались маленькие специальности, вроде древних языков, в которых список потенциальных оппонентов и организаций был таким коротким, что правило изоляции было сложно или невозможно соблюсти, а специалистов было так мало, что, скажем, кончина одного из них могла заблокировать работу целого диссовета. Защиты могли откладываться на годы по этим причинам. Парадоксальным образом от таких сложностей не страдали разросшиеся в предыдущие года специальности вроде экономики, в которых как раз докторов было в избытке.

Можно ли было придумать другой и лучший трафарет? Сложно сказать. Можно было бы развить еще дальше логику, заложенную в трафарет нынешний, например запретить включать в состав оппонентов соавторов научного руководителя (на самом деле именно руководитель обычно подбирает лояльных оппонентов), однако это лишь усугубило бы бедствие малых специальностей с неизвестным выигрышем. Антрополог Джеймс Скотт в своей книге «Благими намерениями государства», одном из самых влиятельных трудов по социальным наукам конца XX века, утверждал, что проблемы, с которыми столкнулся диссертационный трафарет в России, являются неизбежным следствием попытки регулировать человеческую жизнь, опираясь не на локальное знание, а на абстрактные, умозрительные представления о человеческом поведении. Разнообразие обстоятельств, в которых находят себя люди, слишком велико, чтобы можно было придумать единый институциональный механизм, предусматривающий каждое из них. Эта задача, может быть, просто выходит за пределы возможностей человеческого разума.

Такая точка зрения находит некоторое подтверждение в истории борьбы за академическое качество. Те истории успеха, которые мы находим в ней, — это не истории внедрения изощренных механизмов контроля. В университетах, которые весь мир стремится имитировать сегодня, основной схемой контроля является контроль на входе, осуществляемый при найме на долговременную позицию. Гарантией того, что эксперты будут вести себя при этом добросовестно, является не формальная процедура, которой они обязаны следовать, а существование вполне реальных выгод, связанных с наймом сильного кандидата. Кафедра, факультет или департамент, которые занимаются наймом, рассматривают эту процедуру как конкуренцию за престиж, который принесет молодая звезда, и за ресурсы, которые она обеспечит, — приток талантливых аспирантов, грантовых денег и так далее. В свою очередь, сам кандидат рассматривает защиту диссертации как способ послать конкурсному комитету сигнал о том, что именно он — та самая молодая звезда, которая им нужна, и для этого приходит к выводу (безо всякой подсказки со стороны ВАК), что нужно, например, рассеять всякие подозрения, что оппонентов при защите подобрали по принципу беззубости и так далее. До сих пор, во всяком случае, этот механизм обеспечения качества был единственным доказавшим свою способность предотвратить девальвацию степеней.

Автор: Михаил Соколов

Понравился материал? Добавьте Indicator.Ru в «Мои источники» Яндекс.Новостей и читайте нас чаще.

Подписывайтесь на Indicator.Ru в соцсетях: Facebook, ВКонтакте, Twitter, Telegram, Одноклассники.

желудок, тело, кишечник, анатомия человека, стиль 3625, сделай сам, пластиковый трафарет, акриловый майлар, многоразовый


В настоящее время недоступен.
Мы не знаем, когда и появится ли этот товар в наличии.
Материал Пластик
Марка Трафарет
Вес предмета 9 унций

  • 2 набора трафаретов
  • Поставляется в дюймах 3 и 5 дюймов
  • 7 мил пластика
  • Отлично подходит для поделок, чрезвычайно прочный
  • В упаковке 2 отдельных трафарета 3 и 5 дюймов.

трафарет человеческого тела — Даня

23 шаблона человеческого тела Doc Pdf Ppt Free Premium.

16 шаблонов контуров человеческого тела в куриных креветках 2019.

Шаблон человеческого тела Женский Автор Myraethcorax в 2019 Body.

16 шаблонов контуров человеческого тела Doc Pdf Free Premium.

Джинсовая ткань медового цвета с контуром человеческого тела.

16 шаблонов контуров человеческого тела Doc Pdf Free Premium.

Черный контур женщины силуэт женщины контур тела.

Free Blank Body Скачать бесплатно Clip Art Free Clip Art On.

Human Body Outline Drawing Скачать бесплатно Best Human Body.

Схема тела Магдалины Project Org.

18 шаблонов контуров тела Pdf Doc Бесплатные шаблоны премиум-класса.

Free Human Body Outline Printable Download Free Clip Art.

18 шаблонов контуров тела Pdf Doc Бесплатные шаблоны премиум-класса.

Структура тела Magdalene Project Org.

Amazon Com Мужское тело Человек Человек Человеческий стиль 11955 Diy.

Линографическая мужская человеческая фигура. Символы. Разработка шаблона трафарета.

Body Printable Magdalene Project Org.

Элвин, шаблон женского человеческого тела 1 Масштаб 10.

Кость вектор Иллюстрация таза человеческого тела Ai Graphic.

Free Human Outline Template Download Free Clip Art Free.

Шаблон мужского тела в 2019 году.

Шаблон для рисования человеческого тела Скачать бесплатно Best Human Body.

Скачать векторный шаблон преобразования человеческого тела Premium.

16 шаблонов контуров человеческого тела Doc Pdf Free Premium.

Шаблон лица Magdalene Project Org.

Скелет Человеческое тело Руки Ноги Кости Череп Art Stencil.

Человеческий скелет с трафаретом для татуировки крыльев. Автор Ana.

Абстрактные изящные женские тела.

Схема тела Магдалины Project Org.

изображения шаблона диаграммы моды Стоковые Фото Векторы.

Анатомия человеческого тела простым значком.

Free Human Outline Template Download Free Clip Art Free.

Шаблон человеческого скелета в натуральную величину. Шаблон человеческого скелета.

Столбец внутри мужского человеческого тела в виде значка сбоку.

Шаблон тела аниме Con Google Анатомия и рисунок рисунка.

Шаблоны трафаретов для аэрографа Инструмент для рисования Body Kids Cute.

Трафарет для черепа. Раскраска для распечатки скелета.

Человеческое тело.

Огромная коллекция шаблонов для рисования человеческого тела без проблем.

Пустой шаблон человеческого рисунка Рисунок Трафарет Дизайн одежды.

Шаблон чертежа тела на Getdrawings Com бесплатно для личного пользования.

Наброски мужской фигуры на сайте Paintingvalley Com Explore.

Сердце и тело человека.

Gear Human Body Stock Vector 377805526.

Шаблон женского тела Highendflavors Co.

Чертеж модели тела на Getdrawings Com бесплатно для личного пользования.

Изолированные черный цвет абстрактный силуэт человеческого тела логотипы.

Шаблон шкалы трафаретов для рисования на Хэллоуин Кобва.

Шаблон для рисования лица в одежде Мужские шаблоны аниме Body.

Выкройки трафаретов для футболок.

15 Контур человеческого тела PNG для бесплатного скачивания на Premium Art.

Образец печатного шаблона контура человеческого тела Poporon Co.

Схема Человеческой Магдалины Project Org.

Наклейки на внутренние органы человека Eps10.

Запросы трафаретов на июль 2007 г.

Шаблон рисунка человеческого тела Трафарет фигуры 9 голов.

Контур человеческого тела 40 бесплатных иконок Svg Eps Psd Png Files.

Изолированные красочные абстрактные логотипы силуэт человеческого тела набор векторные иллюстрации.

Шаблон для рисования человеческого тела. Шаблон для рисования тела. Мужское лицо.

Силуэт женщины Форма женского тела Силуэт человеческого тела.

Шаблон лица бесплатно шаблон лица для печати для детей бесплатно.

Кишечник Анатомия человеческого тела Форма Форма для печенья Тесто Бисквит Помадка Острый трафарет для части органа Медицинские науки Маленький Большой.

Мышцы человеческого тела набора значка здравоохранения Стоковая Фотография RF Запас.

Мать с коляской и детским набором иконок человеческого тела.

ДНК Генетический организм Форма человеческого тела Форма для печенья Тесто Бисквит Помадка Острый трафарет Дезоксирибонуклеиновая кислота Медицинская научная лаборатория.

Трафарет Roylco Poseable People.

Шаблон для рисования человеческого тела Трафарет для фигуры Jtmartin Co.

Шаблон контура мужского тела, свободный от тела.

Значок боли в мышцах Элемент боли в теле человека для мобильных устройств.

Контурный рисунок мужского тела на Getdrawings Com бесплатно для.

Формы женского тела Человеческое тело Силуэты силуэтов женщин.

Компьютерные иконки Символ человеческого тела Форма женского тела PNG.

Значок мочевого пузыря Знак органа человеческого тела Вектор.

Подробная информация о человеческих фигурах, рисующих шаблоны трафаретов женской и мужской формы тела.

Значок Safe Famile Иллюстрация Значок Подробный набор человека.

Помощь с трафаретом маори Форум по обучению татуировке «Помоги мне».

Isomars 6015 Женский человеческий рисунок для рисования и дизайна.

Человеческие фигуры Рисование трафаретов женского и мужского пола.

Human Body Parts Drawing Скачать бесплатно Best Human Body.

Вектор запаса частей человеческого тела векторные иллюстрации в линию.

Женщина Тело PNG изображения Векторные и Psd файлы Скачать бесплатно.

Фигура человека амебы.

Шаблон человеческого тела Рисунок Face Clip Art Body Outline.

Человек и сердце иконы дома значок подробный набор человеческого тела.

Трафаретная печать своими руками в домашних условиях Изготовление трафарета Photoez 9.

Легкая атлетика Фигурка Спортзал Мужчина Значок Спорт Человеческое тело.

Amazon Com Анатомия человеческого сердца Пластмасса тела человеческого сердца.

Лицо, Граффити, Мужчина, Нью-Йорк, Трафарет, человеческое изображение, часть человеческого тела бесплатное изображение

Местоположение:
  1. Peakpx
  2. Лицо, Граффити, Мужчина, Нью-Йорк, Трафарет, человеческое изображение, Часть человеческого тела
Лицо, Мужчины, Нью-Йорк, Трафарет, Человеческое изображение, Граффити, Часть человеческого тела Public Domain

Лицензия на использование Creative Commons Zero — CC0


Теги этого изображения:

  • граффити,
  • Нью-Йорк,
  • лицо,
  • пропаганда,
  • мужчина,
  • трафарет,
  • стена,
  • человеческое изображение,
  • часть человеческого тела,
  • человеческий череп,
  • человеческое лицо

Основная информация об этом изображении:

Оригинальный размер:

1584 Икс 2392

Формат:

jpg

Размер файла:

666.33 КБ

Разрешение:

1080P

Загружено:

Выберите разрешение, чтобы загрузить это изображение в качестве обоев HD, разрешение вашего экрана:

Настроить разрешение обоев:

  • черный бра лампа

    1912 г. Икс 2816

  • мужская бетонная статуя

    2448 Икс 3264

  • Нью-Йорк, Манхэттен, Горизонт, Америка, экстерьер здания, архитектура

    2368 Икс 3568

  • освещенные высотные здания

    2592 Икс 3888

  • мужская черная кепка New York Yankees

    3456 Икс 5184

  • стеклянное здание с белой рамой

    1536 Икс 2048

  • коричневое бетонное многоэтажное здание

    2448 Икс 3264

  • Статуя Свободы под бело-голубым небом в дневное время

    1536 Икс 2048

  • коричневое бетонное здание под низким углом фотографияPublic Domain

    2304 Икс 3456

  • серый и черный голубь

    1667 Икс 2516

  • высотное здание из стеклаPublic Domain

    2848 Икс 4288

  • один всемирный торговый центр

    1959 г. Икс 3472

  • фотография на высотном здании

    2448 Икс 3264

  • 2 мужская бетонная статуя

    2448 Икс 3264

  • граффити печать

    3264 Икс 2448

  • Нью-Йорк, Город, Здание, Манхэттен, патриотизм, флаг

    4928 Икс 3264

  • коричневый Бруклинский мост

    4032 Икс 2272

  • Маркировка Джастина по трафарету

    2065 Икс 1399

  • роспись мужского лица; мужская синяя футболка и синие джинсовые джинсы

    3000 Икс 1685

  • здание МанхэттенаОбщественное достояние

    3888 Икс 2592

  • центральная площадь в Нью-Йорке

    5616 Икс 3744

  • оранжевый круизный лайнер Public Domain

    2750 Икс 1833 г.

  • Нью-Йорк, Ист-Ривер, водное такси, небоскреб, экстерьер здания

    4000 Икс 2248

  • Белая башня-близнец

    5184 Икс 3456

  • черное безлистное дерево

    5184 Икс 3456

  • синий океан

    3264 Икс 2448

  • Роща Саранчи, Цветы, Сад, Нью-Йорк, дом, деревоPublic Domain

    5440 Икс 4080

  • Бруклинский мост

    4000 Икс 2248

  • 5 400 7891 0 трафарет зебры Public Domain

    4469 Икс 2979

  • коричневый металлический мост

    4032 Икс 2272

  • розовые руки граффити

    3072 Икс 2304

  • коричневые аналоговые часы

    3888 Икс 2592

  • высотные здания

    5184 Икс 3456

  • серая бетонная лестница

    4608 Икс 3456

  • участок бетонных зданий

    3600 Икс 2495

  • карта мира с красными линиями

    5184 Икс 3456

  • два велосипеда у стены с иллюстрациями Public Domain

    3264 Икс 1840 г.

  • черный металлический уличный светильник

    4032 Икс 2272

  • серая пещера

    2588 Икс 1726

  • серая высотная башня

    5184 Икс 3456

  • бетонные высотные здания

    5184 Икс 3456

  • статуя свободы

    4272 Икс 2848

  • серое бетонное здание

    2200 Икс 1061

  • городские здания в ночное время

    5436 Икс 4757

  • Новые функции, Город, Цикл, Нью-Йорк, Йорк, Манхэттен, ночь, городской горизонт

    5472 Икс 3648

  • статуя свободы низкий угол фотоPublic Domain

    4032 Икс 2272

  • серая напольная плитка

    2724 Икс 1905 г.

  • мужское произведение искусства с просроченным временем

    3872 Икс 2592

  • мост Золотые Ворота

    2508 Икс 1672

  • Собака, Домашнее животное, Лицо, Портрет, Мужчины, Голова, Собака, домашние животные

    4029 Икс 3006

  • один всемирный торговый центр

    4032 Икс 2272

  • серый бетонный мост днем

    4272 Икс 2848

Трафаретное микропроцессорное моделирование плюрипотентных стволовых клеток человека для исследования пространственной организации судеб дифференцировки

J Vis Exp.2016; (112): 54097.

Geetika Sahni

1 Департамент биомедицинской инженерии Национального университета Сингапура

Jun Yuan

1 Департамент биомедицинской инженерии Национального университета Сингапура

Yi-

Toh 1 Департамент биомедицинской инженерии, Национальный университет Сингапура

2 Сингапурский институт нейротехнологии (SINAPSE), Национальный университет Сингапура

1 Департамент биомедицинской инженерии, Национальный университет Сингапура

2 Сингапурский институт из нейротехнологии (SINAPSE), Национальный университет Сингапура

# Участвовал в равных долях.

Авторские права © 2016, Журнал визуализированных экспериментов Эта статья цитируется в других статьях PMC.

Abstract

Плюрипотентные стволовые клетки человека (hPSC), включая эмбриональные стволовые клетки и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, обладают внутренней способностью дифференцироваться во все три зародышевых листка. Это делает их привлекательным источником клеток для регенеративной медицины и экспериментального моделирования нормального и патологического органогенеза. Однако дифференцировка hPSCs in vitro является гетерогенной и пространственно неупорядоченной.Технологии клеточного микропроцессора потенциально предлагают средства для пространственного контроля микросреды стволовых клеток и организации итоговых судеб дифференцировки. Микропаттернирование hPSC должно учитывать строгие требования к выживанию и поддержанию hPSC. Здесь мы описываем микрорельеф трафарета как метод, который хорошо совместим с hPSCs. Микроструктуры hPSC определяются геометрией сквозных отверстий клеточного трафарета, которые физически ограничивают места, где hPSC могут получить доступ и прикрепиться к лежащей ниже подложке, покрытой внеклеточным матриксом.Благодаря такому режиму работы существует большая гибкость в использовании субстратов, которые могут адекватно поддерживать hPSC, по сравнению с другими методами создания микропроцессоров клеток. Мы также выделяем критические шаги для успешного создания микрорельефов hPSC. В качестве примера мы демонстрируем, что трафаретное микропроцессорное формирование hPSCs может быть использовано для модуляции пространственной поляризации адгезий клетка-клетка и клеточный матрикс, что, в свою очередь, определяет паттерны дифференцировки мезоэндодермы. Этот простой и надежный метод микропаттернинга hPSCs расширяет перспективы создания экспериментальных моделей для исследования организации ткани и формирования паттерна во время раннего эмбрионального развития.

Ключевые слова: Биология развития, Выпуск 112, Плюрипотентные стволовые клетки человека, микропаттерн клеток, трафарет, судьба дифференцировки, пространственная организация, формирование паттерна ткани, эмбриональное развитие

Введение

Плюрипотентные стволовые клетки человека (hPSC), включая эмбриональные стволовые клетки (hESCs) и индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (hiPSCs) широко используются в регенеративной медицине, а также для экспериментального моделирования нормального и патологического органогенеза из-за их способности дифференцироваться в клеточные клоны всех трех зародышевых листков 1,2 .Судьба дифференцировки hPSCs очень чувствительна к местным факторам окружающей среды, которые могут модулировать аутокринную или паракринную передачу сигналов 1 , а также процессы механотрансдукции, опосредованные физическими сигналами 3-5 . Клеточный микропроцессор включает в себя набор методов, которые были разработаны для пространственной организации геометрии и местоположения клеточной популяции как средства контроля локального клеточного микросреда, такого как межклеточные взаимодействия 6 и межклеточные взаимодействия 3 .В контексте hPSCs микропаттернирование клеток было использовано для получения значительного понимания того, как ниш-зависимая аутокринная передача сигналов модулирует решения о плюрипотентности-дифференцировке hESC 7 и организацию в паттерны ранней эмбриональной дифференцировки 6 . 2D и 3D микрорельефные hPSCs были использованы для контроля размера колонии многоклеточных структур, которые, в свою очередь, повлияли на решения о дифференцировке в трех зародышевых листах 8,9 . Мы использовали многоклеточные микроструктуры hPSC, чтобы модулировать степень межклеточных взаимодействий и межклеточных взаимодействий внутри колонии hPSC, чтобы исследовать, как перекрестные помехи интегрин-E-кадгерин могут приводить к гетерогенности клеточных судеб 10 .Демонстрации из приведенных выше отчетов открывают новые возможности для применения многоклеточных микропаттернов hPSC в качестве экспериментальных моделей для скрининга лекарственной токсичности для заболеваний, связанных с развитием 11 , для изучения влияния факторов роста и гормонов на развитие тканей или органов, а также для разгадки формирование тканевых узоров.

В обзоре Falconnet et. al. 12 , но лишь некоторые из них, такие как микроконтактная печать 7,8,13 , микролунночное культивирование 14,15 , фотонабор 6 и микротрафареты 16 были успешно реализованы с hPSC.Проблема с микропаттернированными hPSCs заключается в их уязвимости и строгом требовании определенных внеклеточных матриц (ECM) и условий роста для прикрепления и выживания клеток. Для 2D-паттернов hPSC микроконтактная печать является одним из наиболее распространенных методов создания микротекстур hPSC на тканевых культурах и стеклянных подложках 13 . Этот метод может быть использован для создания паттерна обычных ECM, используемых в культуре hPSC, включая ламинин и матрицы базальных мембран, такие как Matrigel. Однако обычно требуется двухэтапный процесс нанесения покрытия с помощью поли-D-лизина, а также требуются особые инертные атмосферные и влажные условия для создания стабильных микрорельефов ECM для hPSC для прикрепления к 6,13 .Прежде всего, при выборе каждого метода микропроцессора необходимо учитывать, может ли режим модификации поверхности генерировать hPSC-адгезивные модели ECM с желаемым геометрическим разрешением, минимизируя при этом неспецифическое прикрепление клеток к окружающим областям.

Здесь мы сообщаем об использовании микрорельефа трафарета в качестве простого метода для создания микрорельефов hPSC без дополнительных шагов модификации поверхности перед созданием адгезионных ECM-паттернов для прикрепления hPSC. Трафарет ячейки состоит из тонкой мембраны e.g., полидиметилсилоксановый (PDMS) лист со сквозными отверстиями размером от микрона до миллиметра, запаянными на субстрате для культивирования клеток, чтобы физически содержать покрытия ECM, а затем засеянные hPSC. Поскольку формирование рисунка на трафарете работает путем физического ограничения места, где hPSC может получить доступ и прикрепиться непосредственно к нижележащему субстрату, покрытому ECM, этот метод совместим с различными субстратами, которые могут поддерживать культуры hPSC. Единственное требование — выбор материала трафарета должен обеспечивать обратимое соединение с подложкой.Эти субстраты включают обычный полистирол для культур тканей (TCPS) 17 , конъюгированные с лигандом субстраты 18 , а также эластомерные субстраты с регулируемой жесткостью (, например, ., PDMS) 19 . Этот метод также позволяет покрывать различные ECM, такие как витронектин (или белок VTN), ламинин и матрицы базальной мембраны (, например, , Matrigel и Geltrax), чтобы обеспечить правильное прикрепление и дифференцировку hPSC. Таким образом, мы можем перенести оптимизированные конфигурации ECM-субстрата для конкретной линии hPSC на трафаретные микрорельефы для оптимальной адгезии, выживания и дифференцировки клеточного матрикса.Недавно сообщалось о подобном методе прямой дифференцировки печени с помощью микротекстурирования hESCs с использованием массивов микротрафаретов из поли (метилметакрилата) (PMMA) 16 .

Трафареты ячеек могут быть изготовлены из различных материалов, включая металлы 20,21 , поли (пара-ксилиленовые) полимеры 22,23 , PMMA 16 и чаще всего PDMS 24-28 . Трафареты из кремния и поли (пара-ксилилен) полимеров требуют прямого травления сквозных отверстий на специализированном оборудовании 20-23 , что ограничивает их доступность для биологических пользователей.Трафареты PDMS могут быть изготовлены различными методами в зависимости от требуемого размера элемента, который обычно находится в диапазоне от 3 мкм до 2000 мкм 11,26-29 . Если требуются небольшие элементы, тонкие трафаретные листы могут быть изготовлены путем прессования преполимера PDMS на микроизготовленном силиконовом шаблоне, содержащем рельефы микрорельефов 28 . Для деталей> 1000 мкм лазерный резак CO 2 обеспечивает простой и недорогой метод прямого вырезания рисунков на предварительно отлитом листе PDMS во время изготовления трафарета.Возможность повторного использования трафаретов PDMS также делает их рентабельными для проведения серии экспериментов с достаточной последовательностью.

Здесь мы представляем подробную методологию изготовления трафарета PDMS с элементами 1000 мкм путем лазерной резки и создания микротекстур hESC. Эти микрорельефы hESC использовали для модуляции степени адгезий, опосредованных интегрином и E-кадгерином, в сплоченной колонии hESC, чтобы исследовать, как пространственная поляризация клеточной адгезии приводит к гетерогенности клеточных судеб 10 .

Протокол

ПРИМЕЧАНИЕ. В этом протоколе описано изготовление трафарета PDMS с рисунками размером 1000 мкм путем лазерной резки и создания микрорельефа линии hESC, H9 с использованием трафарета PDMS.

1. Проектирование и изготовление трафарета PDMS для микрорельефа

  1. Создайте на листе трафарета сквозные отверстия желаемой геометрии и размера (, например, , круги 1000 мкм) и прокладку трафарета с помощью программного обеспечения для автоматизированного проектирования 10 .

  2. Вырежьте с помощью лазера трафаретный лист и прокладку на листах полидиметилсилоксана (PDMS) толщиной 120–150 мкм и 2 мм соответственно с помощью лазерного резака CO 2 10 .

  3. Соедините прокладку PDMS с листом трафарета PDMS, используя жидкий неотвержденный PDMS, и запекайте при 60 ° C в течение 3-4 часов, чтобы получить трафарет PDMS для микрорельефа.

  4. Стерилизуйте трафарет PDMS в автоклаве при 120 ° C в течение 30 минут и высушите в печи перед использованием.

2. Поддержание hESC

  1. Культивирование линий hESC в поддерживающей среде без питателя на планшетах для культивирования клеток с 1 × hESC-аттестованной базальной мембраной, покрытой матриксом при 37 ° C и 5% CO 2 .

  2. Пассирование чЭСК, когда они примерно на 70% конфлюэнтны, за 3 мин инкубации при 37 ° C с обработкой диспазой и механическим диссоциацией колоний чЭСК на скопления 100-200 мкм. Пластина сгустков hESCs с плотностью 30-50 комков на 9,6 см 2 площади роста на полистироле культуры ткани, покрытом матрицей базальной мембраны, при соотношении расщепления 1: 6.

3. Трафаретный микропроцессор эмбриональных стволовых клеток человека

  1. Подготовка перед формированием клеточного паттерна

    1. Запечатайте трафарет PDMS на чашке Петри диаметром 60 мм, налив 700 мкл 70% этанола аналитической чистоты в сверхчистой воде в чашку Петри и поместив трафарет сверху.

    2. Поместите чашку Петри в шкаф биобезопасности на ночь, чтобы дать этанолу высохнуть.

    3. Убедитесь, что под трафаретом нет пузырьков, чтобы убедиться, что трафарет плотно прилегает к чашке Петри. Это предотвращает утечку раствора покрытия ECM. Закройте чашку Петри и храните в стерильных условиях, пока она не будет готова для посева клеток.

    4. Приготовьте аликвоты матрикса базальной мембраны, прошедшего квалификацию hESC, в соответствии с Сертификатом анализа.Убедитесь, что каждая аликвота дает 1 × квалифицированный hESC матричный раствор базальной мембраны при разбавлении в 25 мл модифицированной Дульбекко смеси питательных веществ F-12 (DMEM / F12) в соответствии с описанием продукта производителя.

    5. Приготовьте раствор для покрытия ЕСМ, добавив одну аликвоту матрикса базальной мембраны, квалифицированного для hESC, в 16,7 мл DMEM / F12, чтобы получить раствор матрицы базальной мембраны, отвечающий требованиям 1,5 × hESC. Держите весь раствор для покрытия ЕСМ на льду, чтобы предотвратить гелеобразование.

    6. Добавьте в среду для обслуживания hESC 10 мкМ ингибитора ROCK (Y27632).

  2. Покрытие ECM на трафаретной подложке

    1. Обработайте чашку Петри плазмой 100 Вт O 2 в течение 90 секунд. Для обеспечения стерильности открывайте крышку чашки Петри внутри плазменной камеры только перед обработкой плазмой и быстро закрывайте чашку Петри после завершения обработки. Это облегчает смачивание поверхности и предотвращает образование пузырьков воздуха в сквозных отверстиях микрорельефа во время добавления раствора покрытия ECM.

    2. Добавьте 450 мкл 1,5 × hESC-аттестованного матричного раствора базальной мембраны, чтобы покрыть весь трафарет. Закройте чашку Петри самозаклеивающейся пленкой, такой как Parafilm, чтобы предотвратить высыхание раствора, и инкубируйте в течение 5 часов при 37 ° C перед использованием.

  3. Посев ЭСК на трафаретную подложку

    1. Изучите колонии hESC в 6-луночном планшете, чтобы определить области дифференцированных клеток, демонстрирующие потерю типичной морфологии hESC ( e.g., потеря округлой, плотно упакованной морфологии эпителия, высокое соотношение ядро ​​/ цитоплазма с выступающими ядрышками). Удалите дифференцированные области с помощью вакуумного аспиратора.

    2. Дважды промыть 2 мл DMEM / F12 на лунку.

    3. Добавьте 1 мл пищеварительных ферментов, таких как Аккутаза, на лунку 6-луночного планшета и инкубируйте при 37 ° C в течение 8 мин. Осторожно постучите по планшету, чтобы отделить все колонии от субстрата.

    4. Промойте каждую лунку не менее 4 мл DMEM / F12 на 1 мл пищеварительных ферментов и соберите суспензию клеток в коническую пробирку на 15 мл.

    5. Центрифуга клеточной суспензии при 200 × g в течение 3 мин при комнатной температуре.

    6. Аспирируйте, чтобы удалить супернатант, и добавьте 400 мкл поддерживающей среды hESC с добавлением ингибитора ROCK (ROCKi), чтобы повторно суспендировать клетки. Пипетируйте суспензию клеток вверх и вниз 3 раза осторожно, чтобы разбить скопления на отдельные клетки.

    7. Хорошо перемешайте суспензию отдельных клеток и разведите 10 мкл образцов клеток в 190 мкл DMEM / F12 (разведение 1:20). Используйте гемоцитометр, чтобы определить плотность клеток в суспензии исходных клеток.

    8. Рассчитайте необходимую плотность заполнения ячеек для данного трафарета. ПРИМЕЧАНИЕ: Например, мы экспериментально определили, что плотность посева клеток для получения сливающегося монослоя отдельных клеток составляет приблизительно 4 444 клеток / мм 2 . Таким образом, для трафарета с площадью 450 мм 2 и объемом посева 400 мкл потребуется суспензия клеток с плотностью 2 миллиона клеток / 400 мкл.

    9. Разбавьте суспензию исходных клеток до требуемой плотности посева (см. Шаг 3.3.8 ПРИМЕЧАНИЕ) с культуральной средой hESC с добавлением ROCKi.

    10. Добавьте определенный объем клеточной суспензии, содержащей необходимое количество клеток, в каждый трафарет и оставьте чашку Петри в покое в вытяжном шкафу на 5 минут при комнатной температуре, чтобы клетки могли осесть.

    11. Перенесите чашку Петри в инкубатор и инкубируйте в течение 1 часа для прикрепления клеток. Позаботьтесь о поддержании уровня чашки Петри во время процесса переноса, чтобы клетки оставались монослоем на трафарете.

  4. Удаление трафарета и пассивация основы без рисунка

    1. Изучите чашку Петри под микроскопом, чтобы проверить, правильно ли прикреплены клетки к нижележащему субстрату.

    2. Удалите суспензию клеток с трафарета.

    3. Добавьте 2 мл на чашку 0,5% неионного поверхностно-активного вещества, совместимого с культурами клеток, в DMEM / F12 в область вокруг трафарета.

    4. Воспользуйтесь парой пинцетов в автоклаве, чтобы аккуратно снять трафарет.Вращайте раствор неионного поверхностно-активного вещества, пока трафарет отклеивается, чтобы предотвратить высыхание клеток. Визуально наблюдайте за клетками с микрорельефом в чашке Петри.

    5. Инкубируйте клетки с микроструктурой в 0,5% растворе неионного поверхностно-активного вещества-DMEM / F12 в течение 10 минут при 37 ° C.

    6. Аспирируйте раствор неионного поверхностно-активного вещества-DMEM / F12. Промыть 3 раза, используя 2 мл / чашку DMEM / F12.

    7. Добавьте 2 мл / чашку поддерживающей среды hESC с добавлением ROCKi и инкубируйте при 37 ° C в течение ночи.

    8. После инкубации в течение ночи аспирируйте поддерживающую среду hESC с добавлением ROCKi, промойте один раз DMEM / F12 и индуцируйте дифференцировку мезоэндодермы путем добавления 2 мл / чашку среды для дифференцировки с добавлением 100 нг / мл активина, 25 нг / мл BMP4 и 10 нг / мл FGF2.

    9. Оцените микроструктуры, используя фазово-контрастное изображение, и вычислите средние профили интенсивности Брахьюри (T) для каждого паттерна, как описано ранее 8 .

Типичные результаты

В этой статье мы описываем изготовление клеточного трафарета с использованием лазерного резака для создания элементов размером 1000 мкм.Трафарет состоял из 2 частей: тонкого трафаретного листа (приблизительно 100-200 мкм толщиной), содержащего сквозные отверстия микрорельефа, и прокладки PDMS, содержащей раствор для покрытия ЕСМ или суспензию клеток. Здесь в качестве трафаретного листа и прокладки использовались имеющиеся в продаже листы PDMS толщиной 127 мкм и 2 мм соответственно. Другие методы изготовления листов PDMS контролируемой толщины, такие как нанесение покрытия методом центрифугирования, также могут быть использованы для изготовления деталей. Два компонента были скреплены вместе с использованием жидкой неотвержденной смеси преполимера ПДМС-сшивающего агента в качестве адгезива или плазменного связывания и прокаливаются при 60 ° C в течение 3-4 часов ( Рис.1 ).

Материал для трафаретного листа был выбран на основе выбора субстрата для клеточной культуры. При использовании обычного полистирола для культивирования тканей (TCPS) в качестве субстрата для культивирования можно использовать трафареты из PDMS, поскольку соответствие трафаретного листа PDMS образует хорошее уплотнение с жестким TCPS ( E ~ 3 ГПа) ( Рис. 2A ). В экспериментальных планах, где нужно исследовать пространственную неоднородность судьбы стволовых клеток на более мягких субстратах клеточных культур, таких как эластомерные субстраты PDMS с регулируемым диапазоном жесткости от 5 кПа до 2 МПа 30 , можно использовать более жесткие трафаретные материалы.В качестве примера мы продемонстрировали использование трафарета из полиэтилентерефталата (ПЭТ) ( E ~ 2 ГПа) для создания 1 мм колоний hPSC с микрорельефом на более мягкой подложке PDMS, имеющей жесткость ~ 5 кПа ( Рис. 2B ). Трафарет из ПЭТ был изготовлен путем приклеивания прокладки из ПДМС к трафаретному листу, сделанному из имеющихся в продаже пленок ПЭТ (, рис. 2В, вставка ). Мы отмечаем, что необходимое время прикрепления клеток во время процесса микрорельефа было больше (~ 3 часа) на более мягкой подложке PDMS с жесткостью ~ 5 кПа по сравнению с обычными подложками TCPS.

Мы использовали трафаретные колонии hESC с микрорельефом, чтобы продемонстрировать, что пространственная гетерогенность в механических силах, опосредованных клеточной адгезией, может определять раннюю дифференцировку мезоэндодермы. Ранее мы показали, что hESC H9 на периферии колонии испытали более высокую адгезию интегрина, чем клетки внутри колонии, что привело к их преимущественной дифференцировке в Brachyury (T) -положительные клетки мезоэндодермы при индуцировании активином, BMP4 и FGF2 31 () Инжир.3А ). Когда клетки были сформированы в виде разной геометрии (круг, квадрат, прямоугольник и полукруглая дуга) на постоянной площади колонии, геометрическая анизотропия в углах квадрата, прямоугольника и выпуклой кривизны приводила к локальной концентрации опосредованных интегрином сил тяги. и приводит к усилению дифференцировки мезоэндодермы 32,33 . Действительно, картируя интенсивность экспрессии Т в разных местах в пределах одной колонии, мы обнаружили, что степень индукции мезоэндодермы была выше в острых углах квадратных и прямоугольных колоний ( рис.3B, ) и выпуклых кривизнах полукруглой дуги ( рис. 3C, ), что соответствует зарегистрированным областям напряжения с высоким интегрином в анизотропной геометрии 32,33 . Следовательно, микрорельеф может использоваться для модуляции пространственного распределения механических сил, опосредованных клеточной адгезией, в интактной колонии hPSC как средство контроля последующего процесса дифференцировки.

Рис. 1. Генерация PDMS трафарета для микрорельефа. (A) Схема, представляющая критические этапы изготовления трафарета.Лист PDMS толщиной 127 мкм был вырезан лазером для получения разработанных рисунков, а другой лист PDMS толщиной 2 мм был вырезан лазером для изготовления прокладки. Эти два компонента были склеены вместе с неотвержденным PDMS для сборки трафарета. (B) Изображения, показывающие сборку компонентов для формирования трафарета PDMS с круглыми сквозными отверстиями 1 мм. Щелкните здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рис. 2. Колонии чЭСК с микрорельефом (1000 кругов мкм) на различных субстратах для культивирования. Микроскопические изображения колонии микрорельефа hESC сразу после удаления (A) трафаретов PDMS (вставка), используемых для создания микрорельефов hESC на жестких подложках, например , TCPS с жесткостью ~ 2 ГПа и (B) ПЭТ-трафареты (вставка), используемые для создания микрорельефов на более мягких подложках, , например, PDMS с жесткостью ~ 5 кПа. Щелкните здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рис. 3. Влияние микроструктур чЭСК различной геометрической формы на их дифференцировку мезоэндодермы 8 . (A) Микрофотографии hESC различной геометрической формы, но с одинаковой площадью колоний, были созданы с использованием трафаретов PDMS. Фазовые изображения (верхняя панель) и карты интенсивности экспрессии Т (нижняя панель) через 24 часа дифференцировки мезоэндодермы. (B) Профили средней интенсивности T (вдоль белых пунктирных линий на (A)) в изометрических круглых колониях или анизометрических квадратных и прямоугольных колониях. Все колонии имели одинаковую площадь, за исключением круга 50%, который занимал половину площади колонии. (C) Профили средней интенсивности T от вогнутых или выпуклых краев внутрь колонии по полукруглой дуге, как показано белыми пунктирными линиями на (A). Каждый профиль интенсивности в (B-C) представляет собой среднее значение из 16 профилей интенсивности, полученных из 4 колоний. Изображения перепечатаны с разрешения Toh et. al ., 8 . Масштабная линейка = 200 мкм, а RFU — относительная единица флуоресценции. Щелкните здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 4.Схематическое изображение рабочего процесса для микропроцессорных колоний hESC и индукции дифференцировки. Ключевые шаги для успешного создания микрорельефов чЭСК выделены серыми рамками. Щелкните здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Обсуждение

Изготовление трафаретов с микрорельефом

Микрообразцы трафарета обеспечивают идеальный метод для генерации микрорельефов hPSC для исследования формирования паттерна дифференцировки, опосредованной нишами.Ключевым преимуществом трафаретного рисунка перед другими методами создания микрорельефа, такими как микроконтактная печать и фотонабор, является то, что он не требует модификации поверхности и может быть реализован на обычных подложках TCPS. Следовательно, оптимизированные культуральные среды и покрытия ЕСМ для различных линий hPSC могут быть легко перенесены на микрорельеф трафарета.

При изготовлении трафарета ячеек существует ряд ключевых этапов, которые способствуют созданию хороших микротекстур.Точность воспроизведения спроектированной геометрии в микрошаблонах hPSC зависит от качества и последовательности изготовления сквозных отверстий в трафаретном листе. Для исследований с участием многоклеточных микроструктур размером> 1000 мкм сквозные отверстия могут быть изготовлены непосредственно с помощью лазерной резки на предварительно отлитом листе из PDMS. Разрешение лазерной резки зависит от размера пятна лазерного луча и точности механического столика, контролирующего траекторию лазерного луча. Для обычных лазерных резаков CO 2 мы обнаружили, что они могут создавать круглые или изогнутые элементы с хорошей точностью, но не геометрии с острыми углами ( e.г ., квадрат). В тех случаях, когда требуются мелкие или острые детали, сквозные отверстия в трафаретном листе могут быть изготовлены путем формования PDMS на микроизготовленном силиконовом шаблоне, содержащем рельефы микрорельефов 28 . Задача метода формования состоит в том, чтобы в тонких листах ПДМС получить сквозные отверстия микроразмеров без остаточного ПДМС поверх рельефов кремниевого шаблона. Для решения этой проблемы было разработано несколько стратегий, описанных Li et. al . 28

Во время сборки трафаретного листа и прокладки для изготовления ячеечного трафарета необходимо убедиться, что трафаретный лист является плоским и свободным от пыли во время процесса склеивания, чтобы предотвратить утечки из трафарета. Изгибание трафарета во время процесса склеивания может нарушить герметизацию трафарета на культуральном субстрате, что приведет к вытеканию ECM и клеточных растворов из сквозных отверстий микрорельефа. Трафарет следует стерилизовать в автоклаве (120 ° C, 30 мин) и тщательно высушить в печи, чтобы обеспечить хорошее прилегание к субстрату для культивирования.

Еще одним важным фактором является выбор материала листа для трафарета. Трафарет PDMS идеально подходит для создания микрорельефа hPSC на жестких субстратах для культивирования, таких как TCPS с жесткостью ~ 2 ГПа. Однако, если кто-то желает нанести микрорельеф hPSC на более мягкие субстраты, такие как субстраты PDMS, обычно используемые для настройки жесткости клеточного субстрата 34 , соответствие трафаретного листа PDMS затруднит снятие трафарета после процесса посева клеток, тем самым разрушая микрорельефы hPSC.В этом случае выбор материала для трафаретного листа трафарета должен быть выбран таким, чтобы он мог образовывать уплотнение с культуральным субстратом, но мог легко сниматься.

Создание микроструктур hPSC

Протокол для создания микротекстур H9 hESCs на подложках TCPS с использованием шаблона PDMS, представленный здесь, был оптимизирован для достижения конфлюэнтной колонии с хорошей жизнеспособностью клеток и точностью формирования паттерна. Важно, чтобы hPSCs формировали правильные взаимодействия клетка-клетка и клетка-матрица в пределах пространственного ограничения конкретной геометрии, определяемой микропаттернами, чтобы можно было исследовать, как зависящие от геометрии факторы влияют на судьбы дифференцировки.Мы определили несколько критических шагов для успешного создания микротекстов hPSC ( рис. 4 ), и они обсуждаются ниже.

Во-первых, качество культуры hPSC имеет значение. Важно собирать колонии hPSC при 70-80% конфлюэнции, при этом большинство колоний демонстрируют недифференцированную морфологию hPSC при удалении дифференцированных областей. Чрезмерно сливающиеся культуры hPSC обычно вызывают спонтанную дифференцировку, и если дифференцированные области не удалить до посева клеток, дифференцированные клетки нарушат формирование нормального паттерна дифференцировки.

Во-вторых, при сборе колоний hPSC для получения суспензии отдельных клеток критически важно избегать чрезмерной обработки пищеварительными ферментами, потому что это часто приводит к гибели клеток после инкубации в течение ночи, даже если клетки могут прикрепиться изначально. Мы обнаружили, что 8 минут ферментативной обработки оптимальны для линии H9 hESC, культивируемой в нашей лаборатории; хотя мы рекомендуем оптимизировать время обработки отслоения клеток отдельно для разных клеточных линий.

В-третьих, плотность посева клеток играет решающую роль в создании сливающегося монослоя клеток с определенными адгезиями клетка-клетка и клеточный матрикс.Плотность засева клеток рассчитывается на основе среднего размера клеток, площади поверхности трафарета и объема засева клеток, а затем оптимизируется экспериментально. Низкая плотность посева клеток часто приводит к плохой точности формирования паттерна. Учитывая их эпителиальную природу, чПСК имеют сильную тенденцию к агрегированию и росту в виде колоний. Следовательно, когда в микрорельефе клеток недостаточно, прикрепленные клетки будут агрегировать, что приведет к появлению «проплешины» внутри микрорельефа. И наоборот, чрезмерно высокая плотность посева клеток вызовет перенасыщение клеток в микротекстах.Это приводит к формированию множества слоев клеток, особенно на периферии микрорельефа. В этих областях механические силы, опосредованные клеточной адгезией, больше не определяются только в плоскости x-y микрорельефами. Следовательно, судьбы результирующих дифференцировок более случайны и не могут быть коррелированы с механическими факторами, модулируемыми микропроцессором клетки.

Наконец, существует необходимость пассивировать субстрат, окружающий микроструктуры hPSC, с помощью неклеточных адгезивных молекул, чтобы ограничить пролиферирующие или дифференцирующиеся клетки внутри микрорельефа.Это важно для поддержания точности микропаттерна hPSC и, в свою очередь, биохимического и механического градиента окружающей среды для развития паттернов дифференцировки. Совместимые с культурой клеток неионные поверхностно-активные вещества, такие как Pluronic F-127, могут использоваться в качестве пассивирующего агента. При пассивировании поверхностно-активными веществами следует оптимизировать время обработки и концентрацию из-за цитотоксичности поверхностно-активного вещества при длительном воздействии. Как мы обсуждали выше, представленный протокол предоставляет подробные рекомендации для микропроцессорных hPSC с использованием трафарета PDMS, но рекомендуется оптимизация этого протокола, особенно для вышеуказанных критических шагов, для успешной генерации микроприборов hPSC.

Одним из ограничений трафаретного микрорельефа является то, что он больше подходит для создания более крупных микрорельефов в диапазоне от 100 до 1500 мкм. Как упоминалось ранее, для создания очень мелких деталей, предназначенных для формирования рисунка из отдельных ячеек, изготовление трафаретных листов со сквозными отверстиями <50 мкм является очень сложной задачей. Следовательно, мы ожидаем, что использование ЧПСК с микропланшетом хорошо подходит для исследования формирования структуры многоклеточной ткани во время различных процессов развития ( e.g., складывание нейроэпителия или формирование паттерна энтодермы).

Используя микропроцессор для геометрического ограничения популяции hPSC, мы можем установить опосредованные клеточной адгезией механические 10 и паракринные сигнальные градиенты 6 , чтобы контролировать и понимать пространственную организацию результирующих судеб дифференцировки. Эти модели hPSC с микропроцессором и пространственно организованной дифференцировкой, в свою очередь, могут быть переведены на специфические для человека заболевания или модели тератогенного скрининга 11 для врожденных врожденных дефектов.

Раскрытие информации

У авторов нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа поддержана грантом NUS Start up (R-397-000-192-133) и ETPL Gap Fund (R-397-000-198-592). Г.С. — научный сотрудник НУЗ. Авторы хотели бы поблагодарить д-ра Jiangwa Xing за ее техническую поддержку по созданию микропроцессоров клеток.

Ссылки

  • Graf T, Stadtfeld M. Гетерогенность эмбриональных и взрослых стволовых клеток. Стволовая клетка клетки. 2008. 3 (5): 480–483.[PubMed] [Google Scholar]
  • Нисикава С., Гольдштейн Р.А., Ньеррас С.Р. Перспективы индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток для исследований и терапии. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008. 9 (9): 725–729. [PubMed] [Google Scholar]
  • Гилак Ф., Коэн Д.М., Эстес Б.Т., Гимбл Дж. М., Лидтке В., Чен К.С. Контроль судьбы стволовых клеток путем физического взаимодействия с внеклеточным матриксом. Стволовая клетка клетки. 2009. 5 (1): 17–26. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Dalby MJ, Gadegaard N, Oreffo RO.Использование нанотопографии и взаимодействий интегрина с матрицей для влияния на судьбу стволовых клеток. Nat Mater. 2014. 13 (6): 558–569. [PubMed] [Google Scholar]
  • Джоддар Б., Ито Ю. Искусственные нишевые субстраты для эмбриональных и индуцированных культур плюрипотентных стволовых клеток. J Biotechnol. 2013. 168 (2): 218–228. [PubMed] [Google Scholar]
  • Warmflash A, Sorre B, Etoc F, Siggia ED, Brivanlou AH. Метод повторения раннего эмбрионального пространственного паттерна в человеческих эмбриональных стволовых клетках. Нат методы. 2014. 11 (8): 847–854.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Peerani R, et al. Опосредованный нишами контроль самообновления и дифференцировки эмбриональных стволовых клеток человека. EMBO J. 2007; 26 (22): 4744–4755. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Lee LH, Peerani R, Ungrin M, Joshi C, Kumacheva E, Zandstra P. Микропаттернирование человеческих эмбриональных стволовых клеток рассекает клоны мезодермы и энтодермы. Stem Cell Res. 2009. 2 (2): 155–162. [PubMed] [Google Scholar]
  • Хван Ю.С., Чунг Б.Г., Ортманн Д., Хаттори Н., Мёллер Х.С., Хадемхоссейни А.Контроль размера эмбриоидного тела с помощью микролунок регулирует судьбу эмбриональных стволовых клеток посредством дифференциальной экспрессии WNT5a и WNT11. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2009; 106 (40): 16978–16983. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Toh YC, Xing J, Yu H. Модуляция адгезий, опосредованных интегрином и E-кадгерином, для пространственного контроля неоднородности в дифференцировке плюрипотентных стволовых клеток человека. Биоматериалы. 2015; 50 (0): 87–97. [PubMed] [Google Scholar]
  • Xing J, Toh YC, Xu S, Yu H.Метод обнаружения тератогена человека путем дифференцировки и миграции клеток с геометрическими ограничениями. Научный доклад 2015; 5: 10038. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Falconnet D, Csucs G, Grandin HM, Textor M. Подходы инженерии поверхности к микроповерхностям для клеточных анализов. Биоматериалы. 2006. 27 (16): 3044–3063. [PubMed] [Google Scholar]
  • Bauwens CL, et al. Контроль колоний человеческих эмбриональных стволовых клеток и неоднородности размера агрегатов влияет на траектории дифференцировки.Стволовые клетки. 2008. 26 (9): 2300–2310. [PubMed] [Google Scholar]
  • Khademhosseini A, et al. Совместное культивирование эмбриональных стволовых клеток человека с эмбриональными фибробластами мыши на субстратах с микролункообразным рисунком. Биоматериалы. 2006. 27 (36): 5968–5977. [PubMed] [Google Scholar]
  • Mohr JC, de Pablo JJ, Palecek SP. Трехмерная микропланшетная культура эмбриональных стволовых клеток человека. Биоматериалы. 2006. 27 (36): 6032–6042. [PubMed] [Google Scholar]
  • Яо Р. и др. Печеночная дифференцировка эмбриональных стволовых клеток человека в виде микромасштабных многослойных колоний, приводящих к повышенной гомогенности и созреванию.Небольшой. 2014. 10 (21): 4311–4323. [PubMed] [Google Scholar]
  • Mei Y, et al. Комбинаторная разработка биоматериалов для клонального роста плюрипотентных стволовых клеток человека. Nat Mater. 2010. 9 (9): 768–778. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Melkoumian Z, et al. Синтетические пептидно-акрилатные поверхности для длительного самообновления и дифференцировки кардиомиоцитов эмбриональных стволовых клеток человека. Nat Biotechnol. 2010. 28 (6): 606–610. [PubMed] [Google Scholar]
  • Эванс Н.Д. и др.Жесткость субстрата влияет на события ранней дифференцировки в эмбриональных стволовых клетках. Eur Cell Mater. 2009; 18: 1–13. [PubMed] [Google Scholar]
  • Картер С.Б. Гаптотаксические острова: метод ограничения отдельных клеток для изучения реакций отдельных клеток и образования клонов. Exp Cell Res. 1967. 48 (1): 189–193. [PubMed] [Google Scholar]
  • Джимбо Ю., Робинсон Х. П., Кавана А. Одновременное измерение внутриклеточного кальция и электрической активности с помощью структурированных нейронных сетей в культуре. IEEE Trans Biomed Eng.1993. 40 (8): 804–810. [PubMed] [Google Scholar]
  • Райт Д. и др. Многоразовые обратимо запечатываемые париленовые мембраны для формирования структуры клеток и белков. J Biomed Mater Res. А. 2008. 85 (2): 530–538. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Jinno S, et al. Микропроцессорные многослойные трафареты из парилена-C для создания узорчатых динамических совместных культур. J Biomed Mater Res A. 2008; 86 (1): 278–288. [PubMed] [Google Scholar]
  • Джекман Р.Дж., Даффи, округ Колумбия, Чернявская О., Whitesides GM.Использование эластомерных мембран в качестве сухого резиста и для сухого отрыва. Ленгмюра. 1999. 15 (8): 2973–2984. [Google Scholar]
  • Folch A, Jo BH, Hurtado O, Beebe DJ, Toner M. Микроэластичные трафареты для микропроцессорных клеточных культур. J Biomed Mater Res. 2000. № 52 (2): 346–353. [PubMed] [Google Scholar]
  • Park J, et al. Модуляция дифференцировки эмбриональных стволовых клеток на основе микротехнологий. Лабораторный чип. 2007. 7 (8): 1018–1028. [PubMed] [Google Scholar]
  • Чой Дж. Х., Ли Х., Джин Х. К., Бэ Дж. С., Ким Г. М..Микропаттернирование нервных стволовых клеток и нейронов Пуркинье с использованием трафарета из полидиметилсилоксана (PDMS). Лабораторный чип. 2012. 12 (23): 5045–5050. [PubMed] [Google Scholar]
  • Li W, et al. NeuroArray: универсальный интерфейс для формирования паттернов и опроса нейронных схем с разрешением одной ячейки. Научный отчет 2014; 4: 4784. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Guvanasen GS, Mancini ML, Calhoun WA, Rajaraman S, DeWeerth SP. Полидиметилсилоксановые микротрафареты, формованные на трехмерных печатных шаблонах.Журнал Microelectromech S. 2014; 23 (5): 1045–1053. [Google Scholar]
  • Пальческо Р.Н., Чжан Л., Сунь Й., Файнберг А.В. Разработка полидиметилсилоксановых субстратов с регулируемым модулем упругости для изучения механобиологии клеток в мышцах и нервах. PLoS One. 2012; 7 (12): 51499. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Chowdhury F, et al. Материальные свойства клетки диктуют индуцированное стрессом распространение и дифференцировку эмбриональных стволовых клеток. Nat Mater. 2010. 9 (1): 82–88. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Gjorevski N, Boghaert E, Nelson CM.Регуляция эпителиально-мезенхимального перехода посредством передачи механического напряжения через эпителиальные ткани. Cancer Microenviron. 2012. 5 (1): 29–38. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Thery M. Микроподборка как инструмент для расшифровки морфогенеза и функций клеток. J Cell Sci. 2010; 123: 4201–4213. (Pt 24) [PubMed] [Google Scholar]
  • Ерошенко Н., Рамачандран Р., Ядавалли В.К., Рао Р.Р. Влияние жесткости субстрата на раннюю дифференцировку эмбриональных стволовых клеток человека.J Biol Eng. 2013; 7 (1): 7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Бесплатная загрузка Человеческое тело Шаблон PowerPoint Модель Слайд

Бесплатно — Человеческое тело PowerPoint Шаблон

Шаблон PowerPoint «Свободное человеческое тело» настоятельно рекомендуется для использования в медицине и в сфере образования. Этот шаблон помогает студентам читать лекции в интерактивном режиме. Этот слайд не займет много времени на подготовку презентации.Этот слайд представляет собой мгновенный слайд, на котором можно добавлять подписи. Этот слайд экономит ваши деньги и усилия. Вы можете быть крутым и заниматься другими делами, и этот шаблон помогает улучшить процесс обучения. Это также позволяет учащемуся быстро усваивать концепции.

Внешний вид шаблона

Этот шаблон PowerPoint с человеческим телом фантастический человек, который имеет определенную структуру изображения человеческого тела. Детали показаны с помощью стрелок и аккуратно упомянуты. Этот шаблон очень полезен для преподавателей и медицинских работников при объяснении анатомии человека.Сделать презентацию — это один из самых простых способов понять. В этом шаблоне есть изображение человека с некоторыми внутренними органами с их именами, а справа от этой анатомической структуры человека помещена область заголовка.

Загрузите этот бесплатный шаблон PowerPoint с человеческим телом человек , который имеет множество преимуществ. Это лучший способ сделать интерактивную и увлекательную презентацию. Вы можете полностью дать студенту ощущение живого, добавив более подробную информацию об анатомии человека.Вы также можете добавить отдельные изображения внутренних органов и их функций, при этом вы можете настроить этот шаблон по своему усмотрению. Вы также можете добавить в этот шаблон значки, которые помогут сделать презентацию более эффективной.

Особенности этого шаблона

1. 100% настраиваемые слайды и простота загрузки.

2. Слайды доступны в различных узлах и цветах.

3. Слайд в формате 16: 9 и 4: 3.

4. Легко быстро менять цвета слайдов.

5. Привлекательный слайд на тему человеческого тела.

6. Вы можете создать впечатляющую презентацию с помощью этого шаблона и аккуратно маркировать отличительные части.

БЕСПЛАТНЫХ детских ковриков для лепки человеческого тела

Этот забавный практический проект «Человеческое тело для детей» — такой увлекательный способ узнать о наших удивительных телах! Эти коврики для пластилина Human Body — это увлекательный способ для детей всех возрастов узнать о том, что находится внутри нашего тела.Узнайте о частях человеческого тела для детей , заполнив бесплатные печатные коврики для игр playdouh. Дети узнают о системах тела для детей , поскольку они создают кости, скелетную систему, мышцы, органы и многое другое! Используйте эти коврики из пластилина как часть исследования анатомии, создавая модель человеческого тела для детей от детей ясельного возраста, дошкольных, дошкольных, детских садов, детей первого, второго и третьего классов. Просто распечатайте коврики playdoh и узнайте о моих частях тела для детей с помощью практического научного задания.

Человеческое тело для детей

Если вы ищете занятий с человеческим телом для детей , которые помогут детям увлекаться изучением систем организма, вам понравятся эти коврики для лепки с человеческим телом ! Этот проект «человеческое тело для детей» содержит различные игровые маты на выбор для изучения таких частей тела, как органы, мышцы, кости, кровеносная система и т. Д. Это устройство для тела подходит для учеников самого разного возраста, от детей ясельного возраста, дошкольников и детсадовцев до учеников начальной школы 1, 2, 3 и 4 класса.Если вы родитель, учитель или школа на дому, вам понравится использовать эти печатные формы человеческого тела fpr уроки анатомии, изучающие системы человеческого тела для детей .

Коврики для лепки человеческого тела

Начните с прокрутки сообщения до конца в соответствии с условиями использования и щелкните текстовую ссылку с надписью >> ______ <<. PDF-файл откроется в новом окне, чтобы вы могли сохранить шаблон халявы.

Распечатки человеческого тела

Эти БЕСПЛАТНЫЕ коврики из пластилина для печати — отличное занятие для обучения детей для изучения того, что у них под кожей, в том числе:

  • Детский скелет человека
  • частей человеческого тела для детей
  • частей человеческого тела для детей
  • Детские органы

Есть много вариантов, чтобы узнать о костях, органах, мышцах и многом другом в ЦВЕТНОМ ИЛИ ЧЕРНО-БЕЛОМ.Версия с черной линией сэкономит на расходах на чернила принтера.

Детали человеческого тела для детей

Версия для печати мальчика или девочки, костная система или бланк, крупный план или все тело. Прикрепите его к защитной пленке или ламинату для долговечности при многократном использовании или при групповой настройке.

Детские органы человека

Набор пластилинов разных цветов. Каждый включает руководство в правом верхнем углу, но рассмотрите возможность использования с книгой по человеческому телу или распечатанной моей книгой по телу, чтобы направлять студентов.

Детские органы тела

Вы можете добавить все органов человеческого тела для детей , о которых вы узнали. Мы сделали каждый орган разного цвета, чтобы их было легко отличить. Выше мы добавили тонкий и толстый кишечник.

Системы тела для детей

Дети могут использовать пластилин на коврике для человеческого тела крупным планом, чтобы создавать различные органы человеческого тела для детей , чтобы визуализировать то, что находится внутри их тела. внутренних частей тела для детей , которые мы сделали, включали трахею, легкие, сердце, толстый кишечник, тонкий кишечник, желудок, печень, мозг и многое другое.

Активность тела

Используя пластилин, дети могут узнать о своей системе скелета для детей , слепив кости из пластилина для мальчиков и девочек, черного / белого, светлого / темного цвета кожи. Вы можете быть очень общим для простого исследования человеческого тела для детей , или пометить устно или на коврике для пластилина различные кости, такие как череп, грудина, ребра, лучевая, локтевая, тазовая, большеберцовая, малоберцовая, бедренная, коленная, лопатка, юмористическая, фланцы и многое другое.

ПРИМЕЧАНИЕ. Чем старше ребенок, тем больше он будет похож на настоящие кости.

Мышечная система для детей

Дети смогут визуализировать, как мышцы соединяют кости вместе ( с использованием связок ), чтобы ваши кости двигались, используя это упражнение мышцы для детей . Опять же, есть несколько вариантов!

Это такая забава дошкольного возраста человеческого тела , или для учащихся младшего возраста, таких как человеческого тела для детского сада .

Игра человеческого тела

Вы можете даже сыграть в эту игру, где кто-то называет орган, а затем каждый должен добавить этот орган к своему игровому мату. Продолжайте играть и посмотрите в конце, чтобы увидеть, чей человек наиболее анатомически правильный =)

Книга человеческого тела

Ваш отряд оживит эти книги о человеческом теле для детей, головоломки с человеческим телом, рентгеновские снимки для исследования, живые книжки и многое другое!

Занятия с телом для детей

Мы продолжили изучение пяти чувств с помощью этих занятий в начальной школе и дошкольных занятий с человеческим телом :

  • Части мозга для деятельности детей с моделью мозга Playdough и бесплатными рабочими листами для мозга для детей
  • Легкие для детей Рабочая модель и план урока
  • Сердце человека для детей: 2 забавные модели сердца плюс рабочие листы
  • Кровь для детей — Активное познание человеческого тела
  • Возьмите эту бесплатную распечатанную дошкольную распечатку «5 чувств», чтобы исследовать чувства зрения, вкуса, звука, запаха и осязания
  • Human Body Коврики из пластилина для человеческого тела — множество вариантов для изучения различных систем организма, включая простые для дошкольников, скелетную систему, органы, мышцы, нервы и многое другое!
  • Расскажите детям о человеческих клетках для детей с помощью практических занятий, бесплатного читателя для печати, рабочих таблиц о человеческих клетках и многого другого!
  • Human Body Printables создает книгу для печати, которая знакомит студентов с их сердцем, мозгом, мышцами, клетками, кожей, костями, легкими, желудком, кишечником и мочевым пузырем.
  • 4 ЭПИЧЕСКИЕ идеи проекта по скелетной системе для детей — используя такие вещи, как паста, жевательные мармеладки, лего и многое другое, вы можете узнать о человеческом теле в увлекательной и запоминающейся форме.
  • Бесплатные рабочие листы по скелетной системе для детей — все, что вам нужно, чтобы научить детей изучать их тело!
  • Детям понравится узнавать об ухе с этой моделью уха для школьного проекта
  • «
  • Amazing 5 Senses for Kids» — урок, который можно изучить с помощью практических занятий, видео, книг и многого другого!
  • Попробуйте это упражнение на определение вкуса с мармеладом для дошкольного эксперимента.
  • Дети будут в восторге от этих экспериментов с глазами
  • Огромный пакет из 5 заданий по чувствам для исследования органов чувств, а также для изучения некоторых математических задач и обучения грамоте
  • EPIC, Проект человеческого тела в натуральную величину
  • Ознакомьтесь со всеми нашими практическими идеями, чтобы сделать изучение человеческого тела УДОВОЛЬСТВИЕМ и более творческими научными экспериментами для печати для всех возрастов

Наука для детей

Хотите еще больше веселых научных экспериментов для детей? Вам НЕОБХОДИМО попробовать несколько из этих невероятно забавных научных экспериментов для детей! У нас так много забавных, творческих и простых научных экспериментов для детей младшего возраста:

Коврики для лепки Free Playdough

Ищете более веселые, бесплатные коврики для пластилина для печати? Вам понравятся:

  • Интерактивные коврики Playodugh с буквами
  • Простые маты для лепки с алфавитом и начальными линиями
  • Коврик для лепки Smash Playdough для обучения вычитанию в детских садах
  • Коврики для лепки с цифрами в резинке
  • Веселая транспортировка Коврики из пластилина (поезд, автобус, ракета, самолет, лодка и многое другое!)
  • Коврики для пластилина произвольной формы
  • Рабочие листы для дошкольного образования с playdoh
  • Завершите сцену Номерные коврики для пластилина (показано выше)
  • Изготовление тортов на день рождения из пластилина для дошкольных учреждений
  • Коврики из пластилина для домашних животных (птица, черепаха, рыба, кролик, кот, ящерица, собака, змея и т. Д.))
  • Коврики для лепки Emotion Free Printable
  • Коврики для пластилина на День Благодарения с вкусными любимыми блюдами на День Благодарения!
  • Playdough Музыкальные занятия для детей

Детские игрушки для лепки

Ищете удивительные рецепты пластилина, чтобы попробовать? Ознакомьтесь с этими простыми рецептами play doh!

Мои части тела для детей

Используя ресурсы моего сайта, вы соглашаетесь со следующим:

  • Это только для личного использования (для использования в курятнике или классе, пожалуйста, приобретите лицензионную версию для класса здесь, в магазине TPT)
  • Запрещается продавать, размещать, воспроизводить или хранить на любом другом сайте (включая блог, Facebook, Dropbox и т. Д.))
  • Все предоставленные материалы защищены авторским правом. См. Условия использования.
  • Клипарт Покупка и использование с разрешения (авторство см. В файле)
  • Я предлагаю бесплатные печатные издания, чтобы благословить моих читателей И обеспечить свою семью. Ваши частые посещения моего блога и поддержка покупок по партнерским ссылкам и рекламе заставляют светиться, так сказать. Спасибо вам!

>> Коврики для лепки человеческого тела

<<

Изображение человеческого тела и его органы

Главная страница ›Учебные ресурсы› Общие и демонстрационные ресурсы › Изображение человеческого тела и органы


Включает:

  • Обычный контур / шаблоны
  • Карточки со словами для органа
  • Карточки фактов о органах
  • Этикетки для органов
  • Цветная и черно-белая версии

Загрузки

Скачать

— Comic Sans


Скачать

— Фонд Нового Южного Уэльса


Скачать

— новички QLD


Скачать

— Новички в ЮАР


Скачать

— младенец Sassoon


Скачать

— TAS для начинающих


Скачать

— Викт.Прекурсивный (WA / NT / VIC)


Скачать бесплатно

— новички QLD


Как использовать этот учебный ресурс

  • Увеличьте нужные страницы до формата А3 для версии диаграммы.
  • Используйте очертания человеческого тела только для рисования и маркировки всех видов частей тела (см. Также словарные карточки темы «Наше тело»).
  • Ламинируйте и вырежьте изображения органов и надписи — используйте их, чтобы добавить к пустым шаблонам тела.
  • Поместите карточки фактов органов под правильные ярлыки органов / карточки со словами
  • Используйте карты фактов, чтобы сыграть в игру « Построй органы нашего тела». — после первоначального обсуждения фактов, касающихся органов, поместите карты фактов в «волшебную шляпу», «таинственный мешок / коробку».Ребенок выбирает карточку фактов — соответствующий орган затем помещается на пустое человеческое тело — выбирается другая карточка — продолжайте, пока все органы не будут на теле.
  • Придумайте уменьшенные версии вышеупомянутой игры для детей, чтобы они имели индивидуальные очертания тела и органов.
  • Используйте пустые контуры человеческого тела, чтобы дети нарисовали и пометили свои собственные органы или другие части тела.
  • Составьте учебную тетрадь или отдельную книгу, используя шаблон из раздела «Интересные факты о …….. Органы человеческого тела ». Каждый ребенок пишет и рисует один интересный факт, чтобы добавить его в классную книгу.
  • Добавьте словарные карточки органов к другим нашим тематическим карточкам «Наше тело»…

Подобные коллекции ресурсов

Комментарии и обзоры

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *